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色譜柱清洗方法
更新時間:2017-08-18   點擊次數(shù):2500次

吸附的主要原因

  反相硅膠柱填充介質(zhì)(固定相)與樣品間常常會發(fā)生下列吸附現(xiàn)象:

 ?。?)    殘存硅醇基與堿性物質(zhì)間的離子吸附;(2) 硅膠表面的金屬雜質(zhì)與金屬配位物質(zhì)間的吸附;

 ?。?)    疏水性*的物質(zhì)在柱中的蓄積。以上現(xiàn)象,會引起反相色譜柱柱效下降、拖尾、重復(fù)性不良等狀況的發(fā)生

  清洗方法

  1、疏水性物質(zhì)的去除:使用有機溶劑(乙腈、甲醇、乙腈與THF的混合溶劑)進行清洗。 考慮樣品成分對于有機溶劑的溶解性,選用比淋洗液濃度高的有機溶劑、或選用極性較低的有機溶劑進行過柱清洗。這種情況下,有必要注意淋洗液中鹽的析出現(xiàn)象。

  2、堿性物質(zhì)(金屬配位物質(zhì))的去除:使用酸性水溶液與有機溶劑的混合液(0.1%磷酸、0.1%TFA/乙腈、甲醇的混合液)進行過柱清洗。

  *一般來說,清洗時間可選擇為過柱5-10個柱體積便可。

  在附吸成分其吸附力*時,即使進行過清洗,柱性能也有可能得

  不到恢復(fù)。另外,請充分考慮淋洗液的pH值,以避免損壞色譜柱。